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緊湊型“基因魔剪”實現(xiàn)高效編輯

2024-09-24 18:06:23來源:科技日報  

來源標題:緊湊型“基因魔剪”實現(xiàn)高效編輯

瑞士蘇黎世大學與蘇黎世聯(lián)邦理工學院聯(lián)合團隊通過設計小而強大的TnpB蛋白開發(fā)出一種變體。該變體修飾DNA的效率提高了4.4倍,成為一種緊湊、有效的基因編輯新工具。研究成果發(fā)表在最新一期《自然·方法》雜志上。

CRISPR-Cas(又稱“基因魔剪”)系統(tǒng)由蛋白質和RNA組成,最初是作為細菌抵御入侵病毒的自然防御機制而開發(fā)的。

Cas蛋白是從更小的蛋白質進化而來的,其中TnpB是Cas12的祖先。由于Cas蛋白的大尺寸限制了將其遞送到體內目標細胞,最新研究試圖使用其較小的進化祖細胞作為基因組編輯工具。

TnpB蛋白存在于多種細菌和古細菌中。此次研究團隊優(yōu)化了TnpB,使其可比原始蛋白更有效地編輯哺乳動物細胞的DNA。訣竅是通過兩種方式修改該工具:首先,使其更有效地進入基因組DNA所在的細胞核;其次,使其也針對替代基因組序列。

團隊在10211個不同的靶位點測試了TnpB。利用新開發(fā)的人工智能模型,團隊能預測任何給定目標位點的TnpB編輯效率,從而更容易、更快速地設計基因編輯實驗。通過這些預測,團隊在小鼠肝臟中實現(xiàn)了高達75.3%的效率,在小鼠大腦中實現(xiàn)了高達65.9%的效率。

團隊能使用臨床上可行的腺相關病毒載體,有效地將工具運輸到小鼠細胞中。由于其體積小,TnpB基因編輯系統(tǒng)可包裝成單個病毒顆粒。相比之下,CRISPR-Cas9成分必須包裝成多個病毒顆粒,這意味著需要應用更高的載體劑量。

動物實驗進一步表明,新工具能編輯一個調節(jié)膽固醇水平的基因,從而將實驗小鼠的膽固醇降低近80%。

基因編輯讓人類擁有了非凡能力,可對生物體的遺傳指令進行精確修改。引起廣泛關注的CRISPR編輯技術,用到的蛋白通常為Cas9和Cas12。不過,這些蛋白比較笨重,“拖家?guī)Э?rdquo;。TnpB被認為是Cas12的祖先,它更古老,也更緊湊,是有巨大潛力的微型基因編輯工具。此次,研究團隊優(yōu)化了TnpB,把這把“剪刀”打磨得更為鋒利。它能更有效地編輯哺乳動物細胞的DNA,實現(xiàn)了更加簡易的基因編輯。

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